Sådan at reducere ikke-specifik binding til Containere

I et immunoassay bindingskapaciteten i en container eller i mikropladebrønde er højere end mængden af ​​protein anbringes i beholderen eller brønde. For at mindske eller forhindre antistoffer eller andre typer af proteiner og molekyler fra absorbere til beholderen eller brønde , skal assayet vaskes med egnet buffer og en specifik blokeringsreagens skal tilføjes. Den type buffer og blokeringsreagens vælges, afhænger af typen af ​​eksperimentelle assay.Things du har brug
brønde
Bufferopløsning
blokeringsreagens
Pipette
Antigen
antistof

Vis MoreInstructions
1

Smør pladebrøndene med antigenet. Brug et antigen fortynding. Kræves ikke rene opløsninger af antigen , da kun omkring 3 procent af proteinet i prøven er målproteinet . Ved fortynding sikre, at prøverne indeholder antigenet i en koncentration , der ligger inden detektionsområdet af antistoffet. Pipette antigen fortyndingsopløsningen ned pladebrønde . Nogle Pladerne kan være præ- belagt med antigen . Læs vejledningen , der følger med pladebrøndene .
2

Dæk pladerne med en klæbende plast og inkuberes natten over . Pladerne skylles med pufferopløsninger , såsom Tris- pufret saltvand eller phosphatbufret saltvand . At vaske, skylle pladerne ved hjælp af en sprøjteflaske fyldt med bufferopløsningen over et laboratorievask . Pat pladerne med et stykke køkkenrulle til at fjerne de resterende dråber buffer løsning .
3

Reducer uspecifik binding af proteiner og molekyler ved hjælp af et blokerende buffer eller reagens, såsom et rengøringsmiddel blocker, tørmælk eller bovint serum. Den type blokerende reagens vil afhænge af assayet. Tilsæt blokerende reagens til brøndene ved hjælp af en pipette. Dæk pladen igen med selvklæbende plast og inkuberes natten over .
4

igen vaske pladebrøndene igen ved hjælp af en buffer løsning. Disse trin vil mindske mængden af ​​ikke-specifik binding , der kan forekomme til brønde inden tilsætning af den nødvendige antistofopløsning til proceduren. Desuden kan de blokerende reagenser til at mindske baggrundsfarver i resultaterne af analyserne .
Hoteltilbud