Anskaf en plade for celler . Vask pladen to gange med 10 ml PBS ( phosphatbufret saltvand) uden calcium og magnesium. Der tilsættes 2 ml frigørelsescylinderen ( trypsin ) . Inkubér pladen i tre minutter ved 37 grader Celsius. Observere pladen under mikroskop for at sikre, at cellerne har fritliggende . Forsigtigt flytte pladen at løsne alle cellerne fra bunden af pladen . Tilsættes 10 ml af HEK ( human epidermal keratinocyctes ) og FCS ( føtalt ko serum) medium. Brug en 10 milliliter pipette til at flytte cellerne op og ned.
2
Overhold cellerne under mikroskop for at sikre, at de enkelte celler . Pipette ved anvendelse af 10 - ml -pipette , indtil cellerne er enkelt, hvis nødvendigt. Centrifuger cellerne to minutter ved 1.000 omdrejninger i minuttet . Supernatanten . Anbring cellerne i 10 ml føtalt kalveserum. Centrifuger cellerne igen i to minutter ved 1.000 omdrejninger i minuttet . Supernatanten . Placer cellerne i 200 mikroliter ekstern optagelse løsning. Overhold cellerne under mikroskop for enlige celler med en glat membran.
3
Placer saltopløsningen inde i en patch clamp chip. Tilføj en dråbe af intracellulær elektrolyt-opløsning til den nederste del af chippen ved hjælp af en pipette. Monter chippen på et twist hætte. Den skruehætte bør indeholde reference elektrode og sugeledningen. Tilføj en dråbe af ekstracellulær elektrolyt-opløsning til toppen af chippen ved hjælp af en pipette. Elektrolytten løsning giver mulighed for chippen til at komme i kontakt med elektroden. Tilsæt 5 mikroliter cellesuspension til saltopløsningen i chippen . Anbring en enkelt celle ved anvendelse af sugning gennem en pipette. Sugekoppen kan udføres manuelt ved at suge luft gennem pipetten . Placering af cellen stiger modstanden at danne en tætning . Seglet giver mulighed for undersøgelse af hele cellen .
Hoteltilbud